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01
· 試驗(yàn)?zāi)康?middot;
通過斷奶仔豬試驗(yàn)和DSS誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸炎
試驗(yàn)探究幾種植物提取物緩解氧化應(yīng)激與損傷的作用。
02
· 試驗(yàn)設(shè)計(jì)·
選取144頭21日齡的健康杜長大三元仔豬(由湖南某規(guī)模化豬場提供),按遺傳、體重基礎(chǔ)相近的原則隨機(jī)分為4組:對照組(飼喂基礎(chǔ)飼糧)、植物提取物A組(飼喂基礎(chǔ)飼糧+0.1%植物提取物A)、植物提取物B組(飼喂基礎(chǔ)飼糧+0.1%植物提取物B)、植物提取物C組(飼喂基礎(chǔ)飼糧+0.1%植物提取物C),每組6個重復(fù),每個重復(fù)6頭豬,試驗(yàn)期為28天。
此外,選取60只5周齡的c57雄性小鼠,按體重相似的原則隨機(jī)分為5組,每組6個重復(fù),每個重復(fù)2只小鼠,試驗(yàn)期14天。5個處理組分別為:對照組(飼喂基礎(chǔ)飼糧,CTL)、DSS組(飼喂基礎(chǔ)飼糧+DSS誘導(dǎo),DSS)、植物提取物A組(飼喂基礎(chǔ)飼糧+DSS誘導(dǎo)+0.1%植物提取物A)、植物提取物B組(飼喂基礎(chǔ)飼糧+DSS誘導(dǎo)+0.1%植物提取物B),植物提取物C組(飼喂基礎(chǔ)飼糧+DSS誘導(dǎo)+0.1%植物提取物C)。試驗(yàn)在湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院動物試驗(yàn)房進(jìn)行,維持溫度在25±2℃,濕度50±5%,進(jìn)行12h/12h光/暗循環(huán)。試驗(yàn)第1-7天,對照組正常飲水,其他各組小鼠飲水中添加3%的DSS;試驗(yàn)第8-14天,所有處理組恢復(fù)正常飲水。
03
· 樣品采集·
于斷奶仔豬試驗(yàn)第28天,從每個重復(fù)中挑選一只體重最接近均值的仔豬通過前腔靜脈采血獲取血液樣本,用不含抗凝劑的離心管收集室溫傾斜靜止45min,1500g離心15min,收集血清分裝-80℃保存待測。
于小鼠試驗(yàn)第15天早上進(jìn)行小鼠樣品采集,將小鼠放入充滿乙醚的密閉空間中進(jìn)行麻醉處理,隨后采集血液于1.5ml不含抗凝劑的無菌離心管中,常溫靜置30分鐘后1500g離心10min,得到血清后分裝保存于-80℃待測。
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· 抗氧化指標(biāo)測定·
采用比色法測定血清中總抗氧化能力和谷胱甘肽過氧化酶含量;采用羥胺法測定血清中超氧化物歧化酶含量;采用硫代巴比妥酸法測定血清中MDA含量。所有操作嚴(yán)格按照說明書操作方法進(jìn)行。
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· 試驗(yàn)?zāi)康?middot;
采用Excel 2019對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行初步整理計(jì)算,利用SPSS 19.0軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA),用Duncan氏法進(jìn)行多重比較,結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示,當(dāng)P<0.05時為差異顯著。
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· 結(jié)果與分析·
6.1 日糧添加植物提取物緩解斷奶仔豬氧化應(yīng)激的作用
植物提取物對斷奶仔豬血清抗氧化指標(biāo)的影響見圖1,飼糧添加三種植物提取物均顯著提高了斷奶仔豬的總抗氧化能力(P<0.05)。
圖1 植物提取物對斷奶仔豬抗氧化能力的影響
Fig. 1 Effects of plant extracts on antioxidant capacity of weaned piglets
6.2 日糧添加植物提取物緩解小鼠氧化應(yīng)激的作用
飼糧添加植物提取物對DSS誘導(dǎo)的小鼠腸道抗氧化能力的影響見圖2,與對照組相比,DSS組谷胱甘肽過氧化酶活性顯著降低;與DSS組相比,飼糧添加三種植物提取物均可顯著提高小鼠谷胱甘肽過氧化酶活性(P<0.05)。
圖2 植物提取物對小鼠抗氧化能力的影響
Fig. 2 Effects of plant extracts on antioxidant capacity of mice
日糧添加植物提取物可有效提高仔豬和小鼠抗氧化能力,緩解斷奶仔豬和DSS誘導(dǎo)的小鼠氧化應(yīng)激。